作者:南方医科大学2019级医学检验专业 甄嘉伟 钟丽杨 曾晓琳 陈蔚

乙型肝炎(乙肝)是全球性的传染性疾病，相比之下西方国家感染者较少，而中国和其他亚非等国家流行较为严重。我国属于HBV高地方性流行地区。目前我国乙肝病毒携带者人数有近1.2亿，约占全球的45%，乙肝表面抗原携带者人数为全球最多，发病率一直处于法定传染病的前列。在中国人口死亡病因中，同样处在前列的是肝癌，在肝癌患者中，有近86%的患者感染了乙肝病毒。

本病病程长，临床治愈困难，可进展为肝硬化甚至诱发肝细胞癌，严重影响患者的健康与生存质量，因此早期诊断及干预治疗十分必要，是改善预后、控制传染的关键。

乙肝两对半是临床诊断慢性乙型肝炎、评估病毒传染性与疾病转归的常用方法。那它的诊断原理是什么呢？我们知道，肝炎是一种病毒，病毒的表面有自己特异性的抗原。这就像是我们人一样，我们人有不同大小的眼睛嘴巴鼻子，通过这些特征，我们得以分辨不同的个体。病毒也是如此，它的表面也有它所特有的几种特异性抗原（HBsAg、HBeAg、HBcAg），这就像它的面部特征信息一样。不同的是，嚣张的病毒分子不仅会无畏地暴露它的特征，还会将它释放入血。当它侵入我们机体，我们的机体内有类似于“画像师”的树突状细胞，能将它的面部信息刻画下来并传到总部，也就是我们的B淋巴细胞内。我们的B淋巴细胞就会产生特异性的抗体，这些抗体就像是拿着画像抓捕犯人“乙肝病毒”的警察。不同的是，这些警察的任务是十分固定且专一的，他们只抓捕画像上这个犯人，并且将它消灭。而我们对乙肝病毒的体外检测也是运用机体的这一特性，我们在体外制造模拟机体的“抗体”，对血清中的病毒抗原进行捕捉检测。如果运用某种合适的方法检测到该病毒的抗原，那就说明机体已感染此病毒或曾感染过此病毒。

那么需要检测的乙肝病毒抗原有哪些呢？HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。

我们该如何检测呢？ELISA。

ELISA检测通常在多孔微量板中进行，这样可以很方便地进行血清的稀释和检测。在进行检测前，先用目标抗原（抗体）包被多孔板的每个孔，对于商业化的检测，厂家通常会将这个步骤做好。

开始检测前，我们在孔中加入稀释过的待测患者的血清，如果病人血清中有相应的抗体，它们会与孔底的抗原（抗体）结合，只有能与抗原（抗体）结合的特异性抗体才会固定在孔中，接着用缓冲液清洗这些孔，将未结合的多余抗体清除。

然后加入含动物抗体的溶液（可抗人血清抗体），这动物抗体上结合了一个酶。再次清洗这些孔，去除未结合的酶标记抗体。

最后，加入显色溶液，这种溶液中含有可被酶催化显色的底物，底物与第二种抗体上的酶相互作用，可以使溶液呈现明显的颜色。

可以通过肉眼观察或仪器定量读取每个孔中特定抗体的显色结果，随着血清不断被稀释，和抗原结合的抗体量就会减少，颜色也会越来越淡。能出现显色反应的最高稀释倍数就是所测样品的效价。

通过这种方式我们可以测得乙肝病毒抗原的含量，从而对病情的严重程度进行评估，从而进行早期诊断及干预，进从而改善预后和控制传染。