两家医院检测结果差异大,该相信谁? --狼疮抗凝物检测
上个月某日,急诊检验室的电话叮铃叮铃地响了,正在仪器旁忙碌的我赶紧接起电话,原来是耳鼻喉科医生来电咨询:有个3岁小患儿准备行腺样体切除术,术前检查发现APTT为64.6s(见图一),我院APTT参考范围是28-43s,根据行业标准,APTT延长10s以上不可以进行手术。但患儿无任何凝血障碍相关症状,全套凝血因子检查也是正常的。患者家属怀疑我院结果准确性,昨天在我院复查了凝血四项后,立即到另一家医院抽血检测凝血四项,结果大吃一惊!我院结果为57.4s(见图二),仍然延长,而外院结果却是30.4s(见图三),正常。 医生也很困惑,难道真的是我院结果不准?
图一(患者刚入院时APTT结果)
图二(患者本院复查APTT结果)
图三(同一时间患者外院复查APTT结果)
多么熟悉的桥段,去年我也曾遇过一例类似咨询,但当时因条件所限,最终没有为患者找到真相,只能提供一些猜测。而今我们实验室新开展了一个项目,或许能够解答耳鼻喉科医生的疑问。在介绍这个新项目前我们先来了解一下APTT检测这个实验。
APTT检测是内源性凝血途径的筛选实验,但由于试剂品牌繁多,不同的检测系统对肝素、凝血因子、狼疮抗凝物的敏感性不同,故导致APTT检测结果差异较大。经过向外院同行打听得知,外院的凝血检测平台与我院确实不同。
面对单纯APTT延长的检验报告时,我们的思考方向往往有三,一是凝血因子缺乏;二是因子抑制物;三是狼疮抗凝物。随即我便联系医生重取一份标本启动APTT纠正实验,实验结果为即刻实验和温育实验均不能纠正,提示狼疮抗凝物的存在。去年那个类似病例我们只做到这一步骤就无法继续实验了,因为我科未开展狼疮抗凝物检测。而就在上个月,我科正式开展狼疮抗凝物检测。只有真正经历过“巧妇难为无米之炊”的人才能体会自家有粮的珍贵之处。根据APTT纠正实验的结果,我建议医生开具狼疮抗凝物检测的医嘱,结果显示狼疮抗凝物质检阳性。此刻,我们可以非常自信且坚定地回复医生,此患者因为狼疮抗凝物的存在,导致体外APTT实验结果延长。两家医院的结果都没有错,但因不同的凝血检测平台采用不同的激活剂,对狼疮抗凝物的敏感性不同,导致结果有偏差。我院的新项目狼疮抗凝物检测为这一临床难以解释的现象找到了突破口,最终给了患者一个满意的答复。
故事到此为止,接下来我们来了解下故事的主角狼疮抗凝物检测。狼疮抗凝物是抗磷脂综合征确诊的实验室指标之一。它最早是在系统性红斑狼疮患者体内检测出来,但狼疮抗凝物不等于系统性红斑狼疮,也可见于感染或者是正常人一过性的阳性。它的本质是抗磷脂抗体,通过识别磷脂结合的凝血酶原,抑制凝血反应,而磷脂是APTT实验的原材料,故导致APTT结果延长。
狼疮抗凝物检测是一种功能实验,它不是直接检测此物质,而是通过实验设计侧面验证这个物质存在与否。2009年国际血栓和止血学会(ISTH)建议对实验室检查发现不能解释的APTT延长患者进行狼疮抗凝物检测,推荐dVRRT作为首选方法。dVRRT法是用稀释的蝰蛇毒激活凝血反应中的X因子,在磷脂、钙离子的作用下,启动体外凝血,使血液凝固,计算血液凝固需要的时间。狼疮抗凝物的检测报告单中包含三个数据,分别是狼疮抗凝物筛选实验比值,狼疮抗凝物确认实验比值、狼疮抗凝物标准比值。
筛选实验和确认实验都是同样的检测原理(dVRRT法),唯一不同的是筛选实验试剂中含有少量磷脂,若有狼疮抗凝物存在,它与试剂中的磷脂结合,导致实验的原材料缺乏,使反应时间延长;而确认实验恰恰相反,试剂中含有过量磷脂,过量磷脂将标本里的狼疮抗凝物中和掉后,磷脂还是富余的,不会干扰反应,那么反应如期进行,凝固时间比筛选实验缩短。看到这,细心的您可能有个疑问:为何实验结果检测的是标本凝固时间,但是报告单中的单位却是比值?这个有点类似凝血四项检测中的INR比值,在每批次试剂投入使用前选取20个正常人的血浆测得本地区人群的正常凝固时间,标本的凝固时间和正常人群的凝固时间比值就是报告单中的狼疮抗凝物筛选实验比值和确认实验比值,这二者之比便是狼疮抗凝物标准比值。比值<1.2 为阴性,1.2-1.5为弱阳性,1.5-2.0为阳性,>2.0为强阳性。
拿到一份狼疮抗凝物检测的报告单,我们该如何解读呢?首先要知道的是确认实验比值是没有参考范围的,这是因为确认实验比值的数据最终是用来计算标准化比值的。我们看报告单只需要看筛选实验比值和标准化比值即可。假如两者均为阴性,说明不存在狼疮抗凝物,假如筛选实验阳性,标准化比值阴性,说明存在一些物质干扰凝血反应,但是过量磷脂也无法纠正,说明这个物质不是狼疮抗凝物,那究竟是什么呢?可能是因子抑制物,也可能是因子缺乏。这些需要做进一步的实验才能确认。假如两者均为阳性,说明存在一个过量磷脂能够纠正凝血反应的干扰物,这个物质就是狼疮抗凝物。
最后我们回到文章开头的病例来,狼疮抗凝物常见于自身免疫病患者,为什么此患儿会有狼疮抗凝物,医生该如何处理?狼疮抗凝物在儿童这个特殊群体并不少见,因为儿童免疫系统发育不完善,较容易受细菌病毒感染,会导致狼疮抗凝物一过性阳性。如果患者无凝血障碍相关临床表现,且其他凝血指标均正常,医生可持续观察。相关指南建议单次狼疮抗凝物检测阳性并不能确诊抗磷脂综合征,需要间隔12周后复查,结果仍为阳性且结合相关临床表现才有意义。