作者：江苏南通良春中医医院  王向东

新型冠状病毒肺炎疫情不知不觉已持续三个年头，当下国内三十余省多点爆发，给疫情防控工作带来极大的挑战。作为一名基层检验人员，虽然接受过核酸检测的理论培训，但是一直没有机会进PCR实验室进行核酸检测，实乃一大憾事。在疫情肆虐的大环境下，曾有幸参与我们当地全民核酸检测的采样工作，也算为疫情防控做出了自己的一点贡献。现结合我的采样经历，谈一谈核酸检测分析前对核酸结果的影响因素。

一、采样人员培训不充分，采样水平参差不齐

当下流行的新冠病毒株主要为奥密克戎，隐匿性强、传播力强是其主要特点，导致无症状感染者直线上升。某些地方出现一例阳性无症状感染者后，会进行区域封控，然后进行区域内全民核酸检测。由于时间紧急，准备仓促，采样人员不足等原因，疫情主管部门到处抽调人手参与核酸采样。有些采样员没有医学背景，也没有进行过现场培训，零基础，都是自行在网上进行防护用品穿脱及核酸采样培训，根本达不到合格的要求。这就导致采样人员的采样水平参差不齐、差别悬殊，甚至有人分不清扁桃体部位，更谈不上口咽拭子采样的部位准确。采样不合格，必然导致检测结果的偏差。

二、采样对象不配合，不能有效采集到合格的样本（如下图）

全民核酸检测的时候，有不同年龄段的人群，许多人在采样的时候，不能做到完全配合。部分老年人带有义齿，在张开嘴巴的时候，义齿脱落，影响咽扁桃体的暴露；幼儿及儿童对采样拭子的恐惧，导致其不敢张大嘴巴，也影响采样部位的精确度。

三、采样人员没有严格执行采样规范流程

根据采样规范，采样人员需要在咽扁桃体两侧及咽后壁来回3次擦拭，每次不低于3秒钟。在大量被采对象面前，很少有人能完全执行采样规范，这样就导致样本采集量不足，影响结果。

四、采样结束后未对样本进行混匀处理（混采标本）

混采样本一般为10:1和20:1，采集够10个和20个拭子后，放到采样管中。采样管中的病毒保存液不能完全浸没拭子，这就会导致未浸没的拭子不能得到有效的保存。混采管采满后应颠倒混匀采样管，让拭子充分浸入病毒保存液。

五、病毒采样管对核酸结果的影响

“临床分子检测”微信公众号曾刊载过一篇文章《震惊！采样管也会影响新冠病毒核酸检测质量？》，文章评估了11种上海地区广泛使用的采样管，在不同保存温度下（4℃、常温（25℃）和37℃）不同保存时间（0、2、4、6和24h）的保存效果，得出结论，病毒采样管的质量参差不齐。质量差的病毒采样管，可能因为病毒保存液的保存效果不佳而导致核酸检测的结果不准确，也是我们核酸检测分析前的重要影响因素。

六、标本运送及保存因素对核酸检测结果的影响

大规模核酸采样结束后，多数采样点并不能及时把标本送到实验室，这就涉及到标本的保存规范化问题。在《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册》里提到，“标本采集后室温放置不超过4小时，应在2-4小时内送到实验。”如果需要长途运输标本，应采用干冰等制冷方式进行保存，在4℃情况下，标本可以保存24小时。如果超过24h无法检测，应置于-70℃及以下保存（或-20℃暂存）。标本运送期间避免反复冻融。

《检测手册》对标本送检有严格要求，专人运送并保持恒温（2-8℃）运输。但是大规模核酸检测情况下的标本运送员非专业人员，有时候并不能按照规范进行标本运输，这就导致标本在运输途中受温度影响而不够准确。

七、实验室接受标本后

大量的标本送至实验室后，并不能及时进行检测，而要进行前处理。前处理过程中，温度及时间等因素都对结果有影响，这也是实验前分析的重要影响因素。

以上几点是我在核酸采样期间发现、思考并总结出来的核酸检测分析前影响因素，希望能给广大实验室内的同道提供点参考。一个标本结果的准确与否，涉及到标本的分析前、分析中，以及人、机、料、法、环等要素。

我们在做检验的同时，也要想到实验室外的影响因素，人在实验室，心想实验室外，有机会更要走出实验室，看看标本是如何来的，亲自采集标本，掌控标本分析的全局，尽可能的减少误差。

注1：本文部分内容参考《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册》、《新冠肺炎诊疗方案》（试行第九版）、《震惊！采样管也会影响新冠病毒核酸检测质量？》等，以及微信朋友圈，图片来源于抖音，特此感谢。

注2：这是我们团队根据自身新冠核酸采样实际，结合相关文件指南等，探讨总结出最近大家都关心的新冠病毒的核酸检测分析前影响因素，希望能帮助到检验人，以及更广泛的医疗群体，还有普通大众，让大家都知道核酸检测的结果不仅实验室有很重要的责任，实验室外也有很多因素会影响其准确度。面对社会上热议的“新冠患者核酸做了很多次才是阳性”、“新冠患者康复出院后核酸又复阳”等话题，希望我们的科普文章能做出部分解释，减少大众的疑虑。