作者:南方医科大学2019级医学检验专业 甄嘉伟 钟丽杨  曾晓琳 陈蔚

如今新冠肺炎疫情在全世界肆虐，并且逐步在中国蔓延，对于很多中国人来说核酸检测已经逐渐成为了生活的一部分，例如在我生活的城市里从前朋友间互相见面，开口第一句话基本是“你吃饭了吗”，而现在变成了“你今天去做核酸了吗”，核酸检测贯穿了我们的生活，而等待核酸检测报告的时间便自然而然地成为了我们关注的焦点。

一般人眼中的核酸检测流程就像是在医院验血：取标本-放入仪器中检测-出报告、发报告，三步完成，理应很快就能出结果，但结果往往是需要6-8小时。特别是对于急于出差的员工和归家心切的学生，一边是社畜的工作压力和学生对家的思念，一边是等到花都谢了还不出的核酸报告，那可谓如坐针毡。或许有人会感觉很奇怪，明明看起来很迅速简便的操作，为什么要足足6-8个小时才能拿到报告呢？

真正的新冠核酸检测远没想象中的那么简单，我将其分为以下五个步骤：

1.采集后的保存和运输：“大白”采完样本后，将拭子放入保存在病毒保存液中，

病毒保存液可以有效保存病毒和病毒蛋白质结构，同时病毒保存液就像是病毒自己的地盘，里面加入了多种抗生素，正所谓我的地盘我做主，当细菌和真菌想加入时只有一个下场——死亡。当采集完一定数量的标本后，将标本进行层层严密包装，通过专人专车运输到专门的方舱实验室，并要实验室签收。

2.核酸检测前处理：签收后就是实验室人员拆包装，将信息录入系统了。但这个拆包装不是像平时拆快递那随意样，而是需要一个一个包装小心地拆开。每一个都是双层密封包装，每拆开一层包装都要做好自身防控，用酒精喷洒消毒，做好自身防控，就像是给每层包装洗澡一样。然后就是信息录入，对接样本对应人的健康码，全程手工操作。因为样本量是极大，几万个可以说是家常便饭，拆几万个包装就已经累得够呛了，录入信息却还要保证零失误，如果到最后发现少了标本，或者对不上核酸码信息的话，那检测人员真是要一个头两个大了，又必须得在海量标本中重新检查。

3.核酸的提取

（1）震荡：首先将病毒采样管进行充分震荡，将拭子上所占有的细胞和病毒全部抖落到保存液中，使它们全家整整齐齐，一个也不能少。

（2）裂解：病毒是由蛋白质外壳和内部核酸组成，蛋白质外壳就像是盔甲一样保护着内部最重要的核酸，用含有胍盐的溶液可以使蛋白质外壳变性，将内部的核酸释放出

来，这一步相当于脱去了病毒的盔甲，暴露出病毒的“真实面目”。

（3）结合：此时加入特质的磁珠结合液，磁珠可以与核酸成分进行特异性吸附，同时里面含有蛋白质溶解液，可以令蛋白质溶解，更容易分离。打个比方这一步可以看成警察磁珠牢牢抓住坏人病毒核酸。

（4）洗涤：警察磁珠抓住病毒核酸后，核酸上仍有着少量蛋白质，无机盐离子和其他有机杂质，这就像是病毒核酸狡辩词遮羞布，需要去掉才可以将它的犯罪途径充分暴露，所以通过磁珠洗涤液（高盐低PH-吸附核酸，低盐高PH洗脱核酸）充分洗涤，反复两到三次才能将获得高纯度的核酸。

4.检测核酸：新冠肺炎核酸检测采用的是实时荧光PCR的方法。PCR反应指的是聚合酶链式反应，换句话来说PCR技术就是一种放大扩增特定DNA片段的技术。因为在采样标本中提取核酸的量是十分少的，检测机器很难检测，所以需要对其进行扩增。在这里引用之前看过的一篇文章的比喻，把标本提取出来的核酸当成是一块土地，而新冠病毒比作农作物的花生，那么向土地上加入肥料（镁离子，设计的特定引物，dNTP，Taq酶）和水，调节环境温度，历经变性-退火-延伸40次左右的循环，40次循环大约需要两个小时，使得“花生”从2个变成4个最后变成很多很多个，不过普通PCR扩增之后

病毒核酸还是身处“暗处”，我们无法对其进行对量分析，而实时荧光PCR是在PCR反应的基础上加入了荧光探针，每扩增一个片段，荧光探针都会附上去，使得病毒核酸无处遁形。随着扩增次数的增加，通过莹光探测器获得荧光定量曲线从而判断有没有病毒。

5.核查结果，发报告：每一次检测都需要加入各类阴性对照阳性对照，保证实验的质量控制，确保检测结果的可靠，结果出来后，核查结果，核对标本信息，报告发放，数据传输（生成健康码核酸证明。）

总流程：采样保存运输—前处理（消毒，录入信息）—核酸提取—PCR扩增—获取结果—复核结果质量评价—发报告

这就是对核酸检测全过程的简要介绍。检测人员不仅是靠机器进行检测，在全过程中还有许多步骤是需要纯手工操作的，这些都需要大量的时间，改为“检验人员在这巨大的工作量下，可以说个个都身怀绝技”。核酸检测虽然很难像验血那样，一个血常规很快就能出结果，但是检验人员已经是快马加鞭地进行检测，严格地按照规定时间出结果。其实市民们对核酸报告迟迟不出的焦急等待，也是检测人员的心头大事，大家都希望报告能尽早发出，但一切的前提都是准确。正是因为要做如此多的步骤下保持准确性，所以核酸检测报告的发出才需要8-9个小时，同时，随着技术的发展，希望检测流程能够得到更好地完善，从而提高检测效率，方便更多人的生活。

在这个被疫情笼罩的时代，各方各界都在通过自己的努力去抗击疫情。对各个地区的志愿者，医护人员，警察，还有每一位积极响应政府进行核酸检测的民众致敬。让我们携起手来，共同抗击疫情，早日战胜疫情。